摘要：
今天给各位分享基因工程中载体要切割吗的知识，其中也会对基因工程中载体的条件进行解释，如果能碰巧解决你现在面临的问题，别忘了关注本站，现在开始吧！本文目录一览：1、基因工程需要的工... 今天给各位分享基因工程中载体要切割吗的知识，其中也会对基因工程中载体的条件进行解释，如果能碰巧解决你现在面临的问题，别忘了关注本站，现在开始吧！
本文目录一览：
- 1、基因工程需要的工具及操作步骤?
- 2、高中生物~关于基因工程的基本操作步骤~~请问这里在目的基因和载体细胞...
- 3、基因工程中,切割目的基因和载体
- 4、当载体与目的基因连接不上时,应该怎么去进行载体优化
基因工程需要的工具及操作步骤?
基因工程需要三个工具：剪刀：限制酶。针线：DNA连接酶。运输：运载体。基因工程四个步骤：目的基因的获取。基因表达载体的构建（目的基因与运载体结合）。将目的基因导入受体细胞。
工具（1）酶：限制性核酸内切酶、DNA连接酶、（2）载体：质粒载体、噬菌体载体、Ti质粒、人工染色体提取目的基因获取目的基因是实施基因工程的第一步。
基因工程的基本工具：“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取 ②基因表达载体的构建 ③将目的基因导入受体细胞 ④目的基因的检测与鉴定。所以必须具备的条件选D。
高中生物~关于基因工程的基本操作步骤~~请问这里在目的基因和载体细胞...
1、获取目的基因，需要从已有的DNA 分子片段上切下其中的一个片段，类似于你拿一个长长的纸条，要在其中切下某一片段，纸条中某一段表示目的基因，要取下来，左右各需剪一刀，所以获取目的基因需要切两刀。
2、在目的基因和载体细胞连接前，对目的基因需要切两刀，载体需要切一刀或者两刀。如果目的基因两端粘性末端相同，载体切一刀就可以，否则切两刀。
3、提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达。
4、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：目的基因的获取。基因表达载体的构建。将目的基因导入受体细胞。目的基因的检测与表达。其中，构建基因表达载体是基因工程的核心步骤。
基因工程中,切割目的基因和载体
应该是为了获得相同的粘性末端，因为一般来说，一种限制性内切酶只识别一种特定的序列，所以它切下的应该是相同的粘性末端。
要先选定合适的载体，然后在载体上找合适的酶切位点，然后运用Primer5分析酶切位点，以寻找合适的限制性内切酶进行切割。
在目的基因和载体细胞连接前，对目的基因需要切两刀，载体需要切一刀或者两刀。如果目的基因两端粘性末端相同，载体切一刀就可以，否则切两刀。
纸条中某一段表示目的基因，要取下来，左右各需剪一刀，所以获取目的基因需要切两刀。不是载体细胞，而是运载体。常用的质粒，是一个环状DNA分子，只需要剪一刀，形成一个切口，把目的基因插入即可。
当载体与目的基因连接不上时,应该怎么去进行载体优化
1、为了防止目的两端及载体的两端连接在一起，可以用两种限制酶切割目的基因两端，同时也用这两种限制酶切割载体，这样就能形成两种黏性末端，同时也能防止目的基因和载体的自连。
2、如果还是不行，就试试对载体去磷酸化，每一步处理都要在结束后热变性，失活残留的酶，适当加大目的基因的量(10以内)，连接温度也可以在4-16度内用PCR做个梯度！不过如果有平末端的，就不用做这个梯度了。
3、第一种方法是，用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段；（人教版高中生物选修3中提到的E·coliDNA连接酶，来源于大肠杆菌，可用于连接粘性末端；T4DNA连接酶，来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率低。
4、首先，要选择合适的启动子并改进其活性，用以调控目的基因特异性表达。目前在基因工程中多***用特异性启动子，如组织特异性启动子，环境响应启动子及化学诱导启动子等，同时还要对特异性启动子序列进行加倍增强子序列。
5、启动子的选用和改造外源基因表达量不足往往是得不到理想的转基因植物的重要原因。由于启动子在决定基因表达方面起关键作用，因此，选择合适的植物启动子和改进其活性是增强外源基因表达首先要考虑的问题。
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